Centro Andaluz de Biología Molecular y Medicina Regenerativa
Unidad de Microscopia
La Unidad de Microscopía se dedica a la adquisición de imágenes digitales a partir de muestras biológicas mediante microscopía óptica de fluorescencia convencional y microscopía confocal.

RESPONSABLE CIENTÍFICO:
RESPONSABLE TÉCNICO:

Las muestras son preparadas por los usuarios basándose en la utilización de diversos marcadores fluorescentes “in vivo” en la muestra (en el caso de adquisición de imágenes a tiempo real) o bien mediante el uso de técnicas de inmunofluorescencia.

La unidad ofrece diferentes servicios de microscopía confocal a los usuarios, y las tarifas a aplicar dependen de la actividad a realizar.

Además, la unidad ofrece asesoramiento técnico para la cuantificación, procesamiento y análisis de imágenes mediante software específico de análisis de imágenes y estadísticos, esenciales en la interpretación de los resultados.

Una de las aplicaciones más frecuentes en nuestra Unidad es la adquisición de imágenes a partir de muestras fijadas y marcadas mediante técnicas de inmunofluorescencia, con uno o múltiples fluorocromos.

Por otra parte, hay determinados procesos biológicos que por sus características requieren una visualización directa, por lo que la muestra debe estar viva (ya sea un cultivo celular o un organismo).

En estos casos, nuestra Unidad ofrece aplicaciones como las siguientes:

• Time lapse fluorescence imaging
• FRAP: Fluorescence Recovery After Photobleaching
• FLIP: Fluorescence Loss in Photobleaching
• FRET: Fluorescence Resonance Energy Transfer
• Photoactivation y Photoswitching
• Fluorescencia combinada: adquisición de imágenes con fluorescencia y luz transmitida simultáneamente.

La mayoría de las aplicaciones ofertadas por nuestra Unidad necesitan plataformas de análisis de imagen específicas tras la adquisición de imágenes. Es por ello que también ofrecemos asesoramiento para la cuantificación y procesamiento de imágenes con programas como Metamorph, ImageJ y Fiji.
Para solicitar cualquiera de nuestros servicios, previamente debe hacerse una reserva con, al menos, una semana de antelación.

En todos los casos el responsable técnico de la unidad controlará y manejará el microscopio y software.

Para el desarrollo de sus servicios, la Unidad de Microscopía de CABIMER cuenta con el siguiente equipamiento:

• Microscopio Confocal Leica TCS SP5 (AOBS).Dispone de las siguientes líneas de excitación: 405, 458, 476, 488, 496, 514, 561, 594 y 633nm. Este sistema está dotado de una cabina termostatizada que permite realizar experimentos “in vivo”.

• Microscopio Confocal Leica TCS SP5 (Dic. Conv.). Dispone de las siguientes líneas de excitación: 458, 476, 488, 496, 514, 543 y 633nm.

A la hora de elegir los mejores marcadores fluorescentes para un experimento y optimizar combinaciones múltiples, existen varias páginas webs donde podemos comprobar los espectros de excitación y emisión de cada marcador y decidir cual es la combinación más óptima para el experimento en curso, teniendo en cuenta los equipos disponibles en el centro. Algunos de estos sitios útiles son:

• http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/support/Research-Tools/Fluorescence-SpectraViewer.html

• http://www.bdbiosciences.com/research/multicolor/spectrum_viewer/index.jsp

A continuación se enumeran algunas publicaciones cuyas imágenes han sido adquiridas en los equipos de la Unidad de Microscopía de CABIMER:

The liver receptor homolog-1 (LRH-1) is expressed in human islets and protects {beta}-cells against stress-induced apoptosis. Baquié M, St-Onge L, Kerr-Conte J, Cobo-Vuilleumier N, Lorenzo PI, Jimenez Moreno CM, Cederroth CR, Nef S, Borot S, Bosco D, Wang H, Marchetti P, Pattou F, Wollheim CB, Gauthier BR. Hum Mol Genet. 2011 May 11.

Zim17/Tim15 links mitochondrial iron-sulfur cluster biosynthesis to nuclear genome stability.Díaz de la Loza MD, Gallardo M, García-Rubio ML, Izquierdo A, Herrero E, Aguilera A, Wellinger RE. Nucleic Acids Res. 2011 Apr 21.

Tem1 localization to the spindle pole bodies is essential for mitotic exit and impairs spindle checkpoint function. Valerio-Santiago M, Monje-Casas F. J Cell Biol. 2011 Feb 21;192(4):599-614.

Golgi localization of GMAP210 requires two distinct cis-membrane binding mechanisms.Cardenas J. , S. Rivero, B. Goud, M. Bornens, R.M. Rios. 2009. BMC Biology. 28:07:56.

Microtubule nucleation at the cis-side of the Golgi apparatus requires AKAP450 and GM130.Rivero S. , J. Cardenas, M. Bornens, R.M. Ríos. 2009. EMBO J. 28:1016-28.

Chromatin assembly controls replication fork stability. Clemente M. , F. Prado. 2009.. EMBO Rep. (10):790- 796.

A novel approach for organelle-specific DNA damage targeting reveals different susceptibility of mitochondrial DNA to the anticancer drugs camptothecin and topotecan. Díaz de Loza M.C. , R.E. Wellinger. 2009.. Nucleic Acids Res. 37:e26.

A novel class of mRNA-containing cytoplasmic granules are produced in response to UV-irradiation. Gaillard H, Aguilera A. Mol Biol Cell. 2008 Nov;19(11):4980-92.

Para información sobre las tarifas puede ponerse en contacto con nosotros en
el teléfono 95 446 8223.